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<BP5015> ACE Anti HA Antibody-HRP抗體

欄目:大腸桿菌裂菌液及抗體
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血凝素 (英文hemagglutinin) 是指紅血球凝聚素,血凝素具有免疫原性,抗血凝素抗體可以中和血凝素。HA標簽是一段來源于人流感病毒 血凝素蛋白第98~106位氨基酸的短序列,氨基酸序列為YPYDVPDYA,HA標簽的分子量為1.1 KDa,是目前廣泛應用的標簽之一。通過重 組DNA技術(shù)將HA標簽融合到目的蛋白的C端或N端,有利于對目的蛋白進行純化和檢測。抗HA標簽的抗體能對HA標簽融合蛋白進行 準確的檢測和純化,通過一定的工藝將辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)至HA標簽抗體上,進行WB實驗時加入發(fā)光液A和B,一般是魯米諾和 過氧化氫,在辣根過氧化物酶(HRP)的催化作用下,魯米諾與過氧化氫反應生成一種過氧化物,過氧化物不穩(wěn)定隨即分解,形成一種能發(fā)光的 電子激發(fā)中間體,當后者由激發(fā)態(tài)返回至基態(tài),就會產(chǎn)生熒光,實現(xiàn)對HA標簽融合蛋白的快速檢測。


Anti HA Antibody-HRP抗體

產(chǎn)品線

產(chǎn)品目錄名稱

規(guī)格

貨號

目錄價

快速Western Blot

Anti HA Antibody-HRP

20μl

BP5015-01

300

100μl

BP5015-02

900

1ml

BP5015-03

5400


產(chǎn)品介紹 

血凝素 (英文hemagglutinin) 是指紅血球凝聚素,血凝素具有免疫原性,抗血凝素抗體可以中和血凝素。HA標簽是一段來源于人流感病毒 血凝素蛋白第98~106位氨基酸的短序列,氨基酸序列為YPYDVPDYA,HA標簽的分子量為1.1 KDa,是目前廣泛應用的標簽之一。通過重 組DNA技術(shù)將HA標簽融合到目的蛋白的C端或N端,有利于對目的蛋白進行純化和檢測。抗HA標簽的抗體能對HA標簽融合蛋白進行 準確的檢測和純化,通過一定的工藝將辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)至HA標簽抗體上,進行WB實驗時加入發(fā)光液A和B,一般是魯米諾和 過氧化氫,在辣根過氧化物酶(HRP)的催化作用下,魯米諾與過氧化氫反應生成一種過氧化物,過氧化物不穩(wěn)定隨即分解,形成一種能發(fā)光的 電子激發(fā)中間體,當后者由激發(fā)態(tài)返回至基態(tài),就會產(chǎn)生熒光,實現(xiàn)對HA標簽融合蛋白的快速檢測。 

基本信息 

抗體來源:重組抗體 

交叉反應:HA標簽融合蛋白 

克隆類型:單克隆抗體 

偶聯(lián)物:辣根過氧化物酶(HRP) 

純化方式:rProtein A親和純化 

儲存緩沖液:1×PBS (pH7.4) ,0.05% proclin300,50%甘油 


產(chǎn)品應用

WB=1:30000-1:100000 

ELISA=1:5000-1:10000


注意事項 

1) 本產(chǎn)品為HRP直標抗體,需要避光保存于-20℃或者-80℃中; 

2) 本產(chǎn)品靈敏度高,WB稀釋比值請按照說明書進行,否則可能會出現(xiàn)非特異性條帶; 

3) NC膜或者PVDF膜在轉(zhuǎn)膜前需要用甲醇激活,轉(zhuǎn)膜后抗體稀釋液盡量過量,轉(zhuǎn)膜和抗體孵育過程中不要產(chǎn)生氣泡; 

4) 本品在37℃下孵育30min-60min即可產(chǎn)生很明顯的信號,常溫孵育可適當延長時間。


參考信息

1) 表達系統(tǒng):293細胞分泌表達; 

2) 蛋白信息:帶有HA標簽的重組蛋白,大小≈55KDa; 

3) 上樣順序:1為約含有10ng目的蛋白的培養(yǎng)基原樣,2為10ng純化后的目的蛋白,3為牛血清白蛋白(BSA); 

4) 抗體稀釋液體積:10ml; 

5) 抗體孵育條件:37℃搖晃孵育30min; 

6) 顯色:ECL進行顯色; 

7) 結(jié)果:

image.png

1:目的蛋白的培養(yǎng)基原樣(10ng);2:純化后的目的蛋白(10ng);3:牛血清白蛋白(BSA)

8) 結(jié)論:Anti HA Antibody-HRP 按照 1:10000,1:30000 和1:100000稀釋后(抗體稀釋體積10ml)37℃搖晃孵育30min,能夠看到很 明顯的信號,目的條帶位置在55KDa,隨著稀釋比值的增大,信號值會有下降,我們推薦客戶使用1:30000的梯度進行抗體稀釋。


客戶測評 

某高校用本品和實驗室抗體進行相同條件的對比,左圖為本公司直標抗體,右圖為實驗室對照抗體,其結(jié)果如下:

image.png


儲存條件

干冰運輸,-20℃可保存2年,避免反復凍融