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<NBS0262> HAT培養基補充物 (50×)

欄目:NoninBio
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單克隆抗體的生產涉及將骨髓瘤細胞與脾細胞融合,并在含有次黃嘌呤-氨甲蝶呤-胸苷(HAT)補充培養基中選擇雜交瘤(細胞雜交體)。氨甲蝶呤通過抑制二氫葉酸還原酶阻斷DNA的合成。缺乏利用核苷酸補救途徑能力的細胞會被淘汰。具有次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HPRTase)和胸苷激酶(TK)酶的細胞,在提供次黃嘌呤和胸苷的情況下可以利用補救途徑。
這種培養基的目的在于:(1)選擇性地殺死那些適應組織培養、否則會勝過任何產生的雜交瘤的未融合骨髓瘤細胞;(2)消除缺乏HPRT酶的骨髓瘤-骨髓瘤雜交瘤。HPRT酶陽性的脾臟-脾臟雜交瘤雖然對氨甲蝶呤不敏感,但在培養中通常壽命較短。
在選擇完成后(大約10-14周),通過在含有次黃嘌呤-胸苷(HT)的培養基中多次傳代(大約2-3周)將氨甲蝶呤從培養物中稀釋,然后再轉移到正常雜交瘤生長培養基中。

 

HAT培養基補充物 (50×) 

產品編號

產品名稱

包裝規格

促銷價格

NBS0262

HAT培養基補充物 (50×) 

10支/盒

876

 

產品簡介:

單克隆抗體的生產涉及將骨髓瘤細胞與脾細胞融合,并在含有次黃嘌呤-氨甲蝶呤-胸苷(HAT)補充培養基中選擇雜交瘤(細胞雜交體)。氨甲蝶呤通過抑制二氫葉酸還原酶阻斷DNA的合成。缺乏利用核苷酸補救途徑能力的細胞會被淘汰。具有次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HPRTase)和胸苷激酶(TK)酶的細胞,在提供次黃嘌呤和胸苷的情況下可以利用補救途徑。

這種培養基的目的在于:(1)選擇性地殺死那些適應組織培養、否則會勝過任何產生的雜交瘤的未融合骨髓瘤細胞;(2)消除缺乏HPRT酶的骨髓瘤-骨髓瘤雜交瘤。HPRT酶陽性的脾臟-脾臟雜交瘤雖然對氨甲蝶呤不敏感,但在培養中通常壽命較短。

在選擇完成后(大約10-14周),通過在含有次黃嘌呤-胸苷(HT)的培養基中多次傳代(大約2-3周)將氨甲蝶呤從培養物中稀釋,然后再轉移到正常雜交瘤生長培養基中。


屬性:

別名:HAT Supplement, Hypoxanthine-Aminopterin-Thymidin (HAT) media supplement

無菌性:γ射線照射

技術:適用細胞培養,雜交瘤

雜質:內毒素,已測試

儲存溫度:?20°C

 

應用:

1. 次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖基轉移酶 (HPRT) 缺陷型克隆體的選擇和驗證;

2. mAbs(單克隆抗體)制備;

3. 基于熒光素酶的生物測定 (LUC)。

 

制備說明:

用10 ml無菌細胞培養基重懸小瓶的內容物。 儲備溶液足以制備500 ml培養基。 最終工作濃度:100 μM氨基喋呤,0.4 μM氨基喋呤,16 μM胸苷。


注意事項:

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


本產品僅用于生命科學研究,不得用于醫學診斷及其他用途!