磁珠法植物基因組DNA提取試劑盒（單條孔）

產品介紹 

磁珠法植物基因組DNA提取試劑盒為經濟植物樣本的基因組DNA快速制備提供了一個簡單快速的解決方案。該試劑盒采用獨特的緩沖液系統 ， 充分裂解植物細胞釋放基因，再通過醇介導將基因結合于納米磁珠表面，經洗雜液洗去蛋白等雜質，最后在低鹽條件下洗脫得到高純的基因組 DNA。提取過程無需使用有毒的酚氯仿抽提，也無需進行耗時的醇類沉淀。提取的產物可用于PCR、載體構建、核酸雜交、高通量測序、轉基因檢測等下游實驗。

注意事項

1 使用前檢查各組分是否出現沉淀。若有，請輕輕搖晃混合均勻，或37℃水浴重新溶解。

2 RNase（20 mg/ml）請置于-20℃保存。

3使用前請將720μl DTT加入到裂解液PA中去，并置于4℃保存，保質期6個月。

4 沉淀緩沖液使用前請放置冰上預冷。

使用流程

樣品預處理

1 對于纖維含量高的植物組織樣本，將樣本加入液氮研磨或使用組織研磨杵研磨成粉末；對于纖維含量低的植物組織，將組織剪碎成小塊。

2 稱取預處理好的植物組織樣本 50-100 mg，迅速將樣本加入預先裝有350 μl裂解液PA （已加入DTT）的離心管中，用槍頭吹打均勻后， 依次加入40 μl RNase(20mg/ml)、50 μl裂解液PB渦旋混勻，65℃孵育 10-30 min。種子樣本建議起始用量 10 mg。

3 向上一步離心管中加入 130 μl沉淀緩沖液，震蕩混勻，直至出現沉淀。 3.1.4 12,000 rpm（~13,400×g），離心 5 min，使用移液器小心將全部上清轉移到新的離心管中。

自動化法提取-MagET? Smart 8 

1 取出MagET? 植物DNA預分裝試劑條，顛倒混勻數次使磁珠重懸，輕甩MagET? 植物DNA預分裝試劑條使試劑及磁珠集中到試劑條 底部。

注：使用前小心撕去鋁箔封口膜，避免MagET? 植物DNA預分裝試劑條劇烈振動，防止液體濺出。 

2 在MagET? 植物DNA預分裝試劑條的第 2 孔中加入預處理的全部上清液，將 MagET? 植物DNA預分裝試劑條置于 MagET?Smart 8 的試劑盒支架上。

注：請在加樣后 1 h 內上機運行程序。

3 用移液器準確吸取 100 μl洗脫液，加入到 MagET? 洗脫管中，將MagET? 洗脫管安裝于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上，將試劑盒支 架安裝于 MagET? Smart 8設備底座上。

4 將MagET? 4孔磁棒套插入 MagET? Smart 8磁棒套架卡槽內。

5 選擇程序并運行，自動化程序結束后，取下MagET?4孔磁棒套丟棄。拿出試劑盒支架，取下 MagET?洗脫管，蓋上管蓋，即得植物基因組 DNA 產物。如不能及時進行下游試驗，DNA 樣本可短期保存于 -20℃。

表1. MagET? Smart 8 程序設定