甲基纖維素(細胞培養級,粘度:1500mPa.s)
Methylcellulose (Suitable for Cell Culture, Viscosity: 1500 mPa·s)
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 | 價格 |
NBS0532-100g | 甲基纖維素(細胞培養級,粘度:1500mPa.s) | 100g | 1200 |
NBS0532-250g | 甲基纖維素(細胞培養級,粘度:1500mPa.s) | 250g | 2100 |
NBS0532-500g | 甲基纖維素(細胞培養級,粘度:1500mPa.s) | 500g | 3450 |
產品簡介:
甲基纖維素是由纖維素經醚化反應制得的兩親性高分子聚合物,兼具親水性與疏水性基團,保留了纖維素原有的優良理化特性。
本產品為低內毒素細胞培養級別,作為細胞培養凝膠支持集落形成細胞的生長與分化,廣泛應用于造血祖細胞集落形成單位(如CFU-G、CFU-GM)的培養及藥物毒性檢測等實驗。其穩定的凝膠特性有助于模擬體內微環境,促進細胞三維生長,提高實驗結果的可重復性與可靠性。
保存條件:
室溫保存(三年有效)。
產品特性:
1) 中文名稱:甲基纖維素
2) 英文名:Methylcellulose
3) 性狀:白色粉末
4) CAS No.: 9004-67-5
5) 粘度:1500mPa.s
產品使用(CFU(集落形成單位)實驗):
1. 培養基配制
a) 取適量甲基纖維素粉末(通常終濃度1.0–1.5% w/v),加入基礎培養基(如IMDM或RPMI-1640),室溫攪拌30分鐘使其充分水合。
b) 高壓滅菌(121°C,15分鐘)或過濾除菌(甲基纖維素溶液粘度較高,過濾困難,通常采用高壓滅菌)。
c) 冷卻至37°C后,根據實驗需求,添加生長因子(如SCF、IL-3、IL-6、GM-CSF、EPO等)、胎牛血清(FBS,終濃度10–20%)及抗生素。
2. 細胞準備
a) 分離骨髓細胞、外周血單個核細胞或臍帶血細胞。
b) 計數活細胞(臺盼藍排除法),調整濃度至1×105–2×105 cells/ml。
3. 接種培養
a) 將細胞懸液與甲基纖維素半固體培養基按1:10比例混合,充分混勻后,用注射器或專用分液器將1.1 ml混合液接種于35 mm培養皿或6孔板。
b) 輕輕旋轉培養皿使培養基均勻分布,避免氣泡。
4. 培養條件
37°C、5% CO2、飽和濕度培養箱中培養10-14天,期間避免移動或震動,防止集落擴散融合。
5. 集落計數與鑒定
培養結束后,倒置顯微鏡下觀察計數,根據形態區分不同集落類型:
a) CFU-G:粒細胞集落
b) CFU-M:巨噬細胞集落
c) CFU-GM:粒-巨噬細胞混合集落
d) BFU-E:爆式紅系集落
e) CFU-E:紅系集落
f) CFU-GEMM:多系混合集落
6. 結果分析
記錄各類型集落數量,計算集落形成效率(CFE):
CFE =(集落數/接種細胞數)×100%
注意事項:
1. 本品能溶于冷水,形成透明的粘稠溶液,不溶于熱水;
2. 當加熱到一定溫度時甲基纖維素水溶液因凝膠或生成沉淀而成為不透明溶液。但是它在逐漸冷卻后又較變成原來的溶液狀態;
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅用于生命科學研究,不得用于醫學診斷及其他用途!