ApeKI來源于超嗜熱需氧古生菌(Aeropyrum pernix) K1,屬于Type IIP型限制酶,識別并切割G/CWGC序列,形成3堿基突出的粘性末端。ApeKI是基因組簡化測序(genotyping-by-sequencing,GBS)的首選酶之一,此外,還廣泛應用于動植物遺傳研究、群體進化分析及功能基因定位等領域。
識別位點:
GCWGC
5'...G↓C W G C...3'
3'...C G W C↑G ...5'
同裂酶:TseI
注:同裂酶對于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性。
AarI屬于Type IIS型限制酶,是PaqCI的完全同裂酶,識別CACCTGC序列并在其下游進行切割,形成4堿基的5'突出。不同于常規(guī)的Type IIS限制酶,AarI酶切需要兩個或兩個以上識別位點,搭配隨酶附贈的激活劑可實現(xiàn)完全酶切,在沒有激活劑的情況下可以酶切,但無法酶切完全。AarI的識別序列長達7堿基,在基因中的出現(xiàn)頻率較低,尤其適合用于Golden Gate組裝。
識別位點:
CACCTGC(4/8)
5'...C A C C T G C (N)?↓...3'
3'...G T G G A C G (N)?↑...5'
同裂酶:PaqCI
注:同裂酶對于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性。