死細胞核染料

TOTO 3 Far-red Fluorescent Dye (5 mM in DMSO)  

產(chǎn)品簡介：

TOTO 3是一種優(yōu)秀的細胞核和染色體復(fù)染劑，不能穿透活細胞，但能滲透進入具受損膜特征的死細胞，使其在細胞群內(nèi)是一種有用的死細胞指示劑。這一基于羰花青結(jié)構(gòu)的染料呈現(xiàn)遠紅外熒光，激發(fā)和發(fā)射波長分別為642/661nm。TOTO 3的長波長熒光在組織自熒光與DAPI和FITC通道激發(fā)的常見熒光素的光譜區(qū)間之外。

TOTO 3具有以下優(yōu)勢：①長波長光吸收使其熒光基本不受組織自熒光的干擾；②非常強的dsDNA結(jié)合能力，微摩爾級的解離常數(shù)；③對培養(yǎng)細胞和石蠟切片中的細胞核進行明亮的選擇性染色；TOTO 3是一種最靈敏的核酸檢測探針之一，除了用于細胞染色，還能用于固相支持物、預(yù)染凝膠或毛細管電泳樣品的核酸染色。

產(chǎn)品特性：

1）分子量：1354.85

2）分子式：C₅₃H₆₂I₄N₆S₂

3）外觀：溶液（5mM in DMSO）

4）Ex/Em：~642?661m（與DNA結(jié)合）

5）消光系數(shù)：154000 cm ^-1 M ^-1（與DNA結(jié)合）

6）光量子產(chǎn)率：0.06（與DNA結(jié)合）

7）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20°C避光干燥保存，1年有效。 

產(chǎn)品使用：

【注意】：以下步驟適用于大多數(shù)細胞類型。生長培養(yǎng)基、細胞密度、是否存在其它細胞類型都可能影響染色。玻璃表面殘留的去污劑也可能影響許多有機體的染色結(jié)果，在含或不含細胞的溶液內(nèi)都可能看到明亮的染色材料。

1）按照實驗需求培養(yǎng)和處理細胞。

2）吸走培養(yǎng)基和固定細胞。

3）加入TOTO 3工作液（1-10 μM）到細胞內(nèi)（或懸浮細胞，或貼壁細胞），染色15-60min。

【注①】于實驗前將低溫保存的儲存液TOTO 3（5mM in DMSO）置于室溫（25℃）或溫育片刻使其充分融化，低速離心后，吸取適量儲存液用HHBS緩沖液或其它生理緩沖液稀釋到工作濃度。第一次使用儲存液的時候可根據(jù)單次用量分裝，≤-20°C避光干燥保存，降低反復(fù)凍融次數(shù)。

【注②】第一次實驗務(wù)必嘗試幾種染色濃度，以確定最佳的工作濃度。高染料濃度很可能引起其它細胞結(jié)構(gòu)的非特異染色。

4）吸走染色工作液，加入HHBS緩沖液或其它適宜的緩沖液。

5）用熒光顯微鏡（Cy5濾片）來觀察染色結(jié)果。

注意事項：

1.      TOTO^?是Thermo Fisher Scientific公司的注冊商標。

2.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

3.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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