核酸助沉劑糖原(20mg/ml)
Glycogen (20mg/ml), Molecular Biology Grade
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 | 價格 |
NBS8124-500ul | 核酸助沉劑糖原(20mg/ml) | 500ul | 528 |
NBS8124-1ml | 核酸助沉劑糖原(20mg/ml) | 2x500ul | 990 |
產品簡介:
糖原(Glycogen)是動物細胞合成的葡萄糖分枝狀聚合物,用于能量儲藏和釋放。是淀粉類似物,結構與支鏈淀粉類似,用作二次長期儲能。用作核酸沉淀的載體物質。一種惰性載體,能明顯提高乙醇沉淀法中提取DNA和RNA的回收率。糖原不溶于乙醇,形成捕獲目的核酸的沉淀。離心后形成肉眼可見沉淀,從而使得處理沉淀下來核酸變得更為方便。與傳統的tRNA輔助沉淀法相比,糖原從稀釋溶液中沉淀核酸量效率更高。另外,由于糖原本身不含DNA或RNA,用其沉淀所得的核酸更適合用于后續的PCR、RT-PCR以及內切酶等核酸酶反應。
本品為糖原溶液,濃度為20mg/ml,不含DNase和RNase,達分子生物學級別。適用于DNA或RNA沉淀用的輔助沉淀劑,通常每1μl糖原(20mg/ml)可把pg級的DNA或RNA從1ml溶液體系中沉淀出來。
保存條件:
-20℃保存,至少1年有效。
產品使用(適用于稀釋溶液中沉淀DNA):
【注①】:以下步驟適用于DNA沉淀,對于RNA沉淀需特別注意使用無RNA酶的吸頭、離心管和水。
【注②】:以下步驟僅做參考,請根據實際實驗需求和方法來優化糖原的工作濃度以及相應步驟。
1)往DNA溶液中加入1/10體積的3M乙酸鈉(或2M氯化鈉,或5M乙酸銨)。
2)加入糖原(5mg/ml)使其終濃度為0.02~1mg/ml。
【注①】:糖原的工作濃度請參考文獻或特定的操作說明進行。對于寡核苷酸,建議工作濃度不要超過1mg/ml。
3)加入1倍體積的異丙醇(或2.5倍體積的乙醇)到溶液內,輕輕混勻。<200bpDNA片段需用乙醇。
4)于-20℃孵育混合物60min,或-70℃孵育30min。更長的孵育時間和更低溫度能產生更好的核酸回收率。
5)10,000rpm離心混合物10~15min。
6)吸走上清。
7)用70%冰乙醇清洗沉淀。
8)晾干沉淀。避免過度晾干沉淀,否則需花費更長時間來溶解。
9)用不含核酸酶的水或TEbuffer來溶解DNA。
注意事項:
1. 對于單次用量比較少的用戶,建議收到本品第一次使用時,小量分裝凍存,減少反復凍融次數。
2. 有文獻報道,經糖原沉淀的連接反應產物,幾乎不會干擾后續的細菌轉化。糖原(1μg/ml)不會抑制TdT活性,糖原(<2mg/ml)幾乎不會影響反轉錄酶活性,糖原(0.02mg/ml)不會抑制T4 RNA連接酶活性。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關產品:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
1g | ||
1ml | ||
500ul |