全細(xì)胞內(nèi)參抗體

Anti Hsp90 Antibody-HRP

產(chǎn)品介紹 

Hsp90 屬于熱休克蛋白家族，其余成員包括Hsp110、Hsp70、Hsp60以及小分子熱休克蛋白，家族成員共有一個非常特殊的C型模式與 ATP結(jié)合。Hsp90是細(xì)胞中含量最豐富的蛋白質(zhì)之一，分子量約90kDa，對真核生物的生存能力至關(guān)重要，Hsp90也是常用的內(nèi)參抗體 之一。AntiHsp90Antibody-HRP 是通過一定的工藝將辣根過氧化物酶 (HRP) 偶聯(lián)至Hsp90抗體上，進(jìn)行WB實驗時加入發(fā)光液A和B， 一般是魯米諾和過氧化氫，在辣根過氧化物酶 (HRP) 的催化作用下，魯米諾與過氧化氫反應(yīng)生成一種過氧化物，過氧化物不穩(wěn)定隨即分 解，形成一種能發(fā)光的電子激發(fā)中間體，當(dāng)后者由激發(fā)態(tài)返回至基態(tài)，就會產(chǎn)生熒光，實現(xiàn)對Hsp90內(nèi)參蛋白的檢測。 

基本信息 

抗體來源：重組抗體 

交叉反應(yīng)：人、小鼠 

克隆類型：單克隆抗體 

偶聯(lián)物：辣根過氧化物酶 (HRP) 

純化方式：rProteinA 親和純化 

儲存緩沖液：1×PBS(pH7.4) ，0.05%proclin300，50%甘油 

儲存條件 

干冰運(yùn)輸，-20℃可保存2年，避免反復(fù)凍

產(chǎn)品應(yīng)用 

WB=1:1000-1:5000

注意事項 

1) 本產(chǎn)品為HRP直標(biāo)抗體，需要避光保存于-20℃或者-80℃中； 

2) 本產(chǎn)品靈敏度高，WB 稀釋比值請按照說明書進(jìn)行，否則可能會出現(xiàn)非特異性條帶； 

3) PVDF 膜在轉(zhuǎn)膜前需要用甲醇激活，轉(zhuǎn)膜后抗體稀釋液盡量過量，轉(zhuǎn)膜和抗體孵育過程中不要產(chǎn)生氣泡； 

4) 本品在37℃下孵育 30-60min 即可產(chǎn)生很明顯的信號，常溫孵育可適當(dāng)延長時間； 

5）本品對人Hsp90蛋白的靈敏度高于鼠Hsp90蛋白。

參考信息 

1) 樣本信息：293、Hela和EL4-B5細(xì)胞系； 

2) 樣品處理：3×106細(xì)胞PBS清洗三次后加入1mlPBS重懸，取10μl重懸液加入10μl2×loadingBuffer，100℃高溫煮沸10min； 

3) 上樣體積：10μl（含2×loadingbuffer）； 

4）抗體稀釋比值：5ml抗體稀釋液中加入1μl（1：5000）和5μl（1：1000）AntiHsp90Antibody-HRP抗體； 

5) 抗體孵育條件：37℃搖晃孵育30min；