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<BK0014> ACE 磁珠法質粒DNA小量提取試劑盒(單條孔)

欄目:核酸提取純化
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磁珠法質粒DNA抽提試劑盒采用經典的SDS堿裂解法充分裂解釋放質粒,再通過醇介導將質粒結合于納米磁珠表面,經洗液洗去蛋白等雜質,最后洗脫得到高純的質粒產物。產物可用于酶切、轉化、PCR、測序等分子生物學實驗。


磁珠法質粒DNA小量提取試劑盒(單條孔)

產品線

產品目錄名稱

規格

貨號

目錄價

核酸提取純化

磁珠法質粒DNA小量提取試劑盒(單條孔)

48 T

BK0014-01

143


產品介紹 

磁珠法質粒DNA抽提試劑盒采用經典的SDS堿裂解法充分裂解釋放質粒,再通過醇介導將質粒結合于納米磁珠表面,經洗液洗去蛋白等雜質, 最后洗脫得到高純的質粒產物。產物可用于酶切、轉化、PCR、測序等分子生物學實驗。

試劑名稱

48 T

溶液 P1

5 ml

溶液 P2

5 ml

溶液 P3

5 ml

RNase (20 mg/ml)

500 μl

MagET? 質粒DNA預分裝試劑條

16*3

洗脫液

5 ml

MagET? 洗脫管

48

MagET? 4孔磁棒套

2*6


注意事項 

1 使用前檢查各組分是否出現沉淀。若有,請輕輕搖晃混合均勻,或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前請將RNase(20mg/ml)全部加入溶液 P1 中,用完置于4℃保存。


使用流程 

樣本預處理 

1 取1-5ml 細菌培養物,加入離心管中,使用常規臺式離心機12,000rpm(~13,400×g)離心1-5 min ,盡量吸盡上清。(菌液較多時可以通 過多次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中)。 

2 向留有菌體沉淀的離心管中加入100 μl 溶液 P1(請先檢查是否加入RNase),使用移液器或渦旋振蕩器徹底懸浮細菌沉淀。注意:如果 菌體未徹底混勻,質粒提取量和純度會偏低。 

3 向離心管中加入100 μl 溶液 P2,溫和的上下翻轉6-8次使菌體充分裂解,室溫靜置1~ 5 min(時間不宜過長),以免質粒DNA受到破壞 。 

4 向離心管中加入100 μl 溶液 P3,立即溫和地上下翻轉6-8次,充分混勻,此時會出現白色絮狀沉淀。12,000rpm(~13,400×g)離心 5min,小心吸取全部上清,備用。

自動化法提取 -MagET? Smart 8 

1 取出MagET? 質粒DNA預分裝試劑條,顛倒混勻數次使磁珠重懸,輕甩MagET? 質粒DNA預分裝試劑條使試劑及磁珠均集中到試劑 條底部。

注:使用前小心撕去鋁箔封口膜,避免MagET? 質粒DNA預分裝試劑條振動,防止液體濺出。 

2 在MagET? 質粒DNA預分裝試劑條的第 2 孔中加入 3.1.4 中預處理后的全部上清液,將MagET? 質粒DNA預分裝試劑條置于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上。

注:請在加樣后1h內上機運行程序。 

3 用移液器準確吸取 100 μl洗脫液,加入到MagET? 洗脫管中,將MagET? 洗脫管置于于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上,將試劑盒支架安裝于 MagET? Smart 8設備底座上。

4 將MagET? 4孔磁棒套插入 MagET? Smart 8 磁棒套架卡槽內。

5 選擇程序并運行,自動化程序結束后,取下MagET? 4孔磁棒套丟棄,拿出試劑盒支架,取下MagET? 洗脫管,蓋上管蓋,即得質粒 DNA 產物。如不能及時進行下游試驗,質粒DNA 樣本可短期保存于 -20℃。

表1. MagET? Smart 8 程序設定

流程

工作孔位

名稱

時長

幅度

頻率

磁吸時間

轉移等待

溫度

加熱時間

1

1

取磁珠

1min

最大

最快

60s

0

-

0

2

2

結合

5min

較大

較快

90s

0

-

0

3

3

洗雜

1min

較大

較快

60s

0

-

0

4

4

洗雜

1min

較大

較快

60s

120s

-

0

5

6

洗脫

5min

較大

較快

90s

0

-

0

6

1

棄磁珠

1min

最大

最快

0

0

-

0