磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(單條孔)
產(chǎn)品線 | 產(chǎn)品目錄名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) | 目錄價(jià) |
核酸提取純化 | 磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(單條孔) | 48 T | BK0015-01 | 143 |
產(chǎn)品介紹
本試劑盒采用高效、專一結(jié)合DNA的硅基磁珠和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其他有機(jī)化合 物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì),回收100 bp-10 kb DNA片段,回收率高達(dá)80%。回收的DNA 片段可直接用于酶切、連接、PCR 擴(kuò)增、二 代測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等下游生物實(shí)驗(yàn)。
試劑名稱 | 48 T |
MagET? DNA回收預(yù)分裝試劑條 | 16*3 |
洗脫液 | 5 ml |
MagET? 洗脫管 | 48 |
MagET? 4孔磁棒套 | 2*6 |
注意事項(xiàng)
1 使用前檢查各組分是否出現(xiàn)沉淀。若有,請(qǐng)輕輕搖晃混合均勻,或37℃水浴重新溶解。
2 電泳時(shí)使用新的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果。
3 如下一步實(shí)驗(yàn)要求較高,則盡量使用TAE電泳緩沖液。
4 切膠時(shí),紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對(duì)DNA造成損傷。
使用流程
樣品預(yù)處理
將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下,盡量切除多余部分,放入干凈的離心管中,稱重。膠濃度為1%時(shí),重量≤300 μg,膠塊濃度為 3%時(shí),重量≤100 μg。
自動(dòng)化法提取 -MagET? Smart 8
1 取出MagET? DNA回收預(yù)分裝試劑條,顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸,輕甩MagET? DNA回收預(yù)分裝試劑條使試劑及磁珠均集中到試劑 條底部。
注:使用前小心撕去鋁箔封口膜,避免MagET? DNA回收預(yù)分裝試劑條振動(dòng),防止液體濺出。
2 在MagET? DNA回收預(yù)分裝試劑條的第 2 孔中加入切下的瓊脂糖凝膠塊,將MagET? DNA回收預(yù)分裝試劑條置于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上。
注:請(qǐng)?jiān)诩訕雍? h內(nèi)上機(jī)運(yùn)行程序。
3 用移液器準(zhǔn)確吸取 100 μl洗脫液,加入到MagET? 洗脫管中,將MagET? 洗脫管置于 MagET? Smart 8的試劑盒支架上,將試劑盒 支架安裝于 MagET? Smart 8設(shè)備底座上。
4 將MagET? 4孔磁棒套插入 MagET? Smart 8 磁棒套架卡槽內(nèi)。
5 選擇程序并運(yùn)行,自動(dòng)化程序結(jié)束后,取下MagET? 4孔磁棒套丟棄,拿出試劑盒支架,取下MagET? 洗脫管,蓋上管蓋,即得回收的 DNA 產(chǎn)物。如不能及時(shí)進(jìn)行下游試驗(yàn),DNA 樣本可短期保存于 -20℃。
表1.MagETTM Smart 8 程序設(shè)定
流程 | 工作孔位 | 名稱 | 時(shí)長(zhǎng) | 幅度 | 頻率 | 磁吸時(shí)間 | 轉(zhuǎn)移等待 | 溫度 |
1 | 1 | 取磁珠 | 1min | 最大 | 最快 | 60s | 0 | - |
2 | 2 | 結(jié)合 | 10min | 較大 | 較快 | 90s | 0 | 80°C |
3 | 3 | 洗雜 | 1min | 較大 | 較快 | 60s | 0 | - |
4 | 4 | 洗雜 | 1min | 較大 | 較快 | 60s | 120s | - |
5 | 6 | 洗脫 | 5min | 較大 | 較快 | 90s | 0 | - |
6 | 1 | 棄磁珠 | 1min | 最大 | 最快 | 0 | 0 | - |