pH熒光探針（紅600）

產(chǎn)品簡介：

pH Red熒光染料展現(xiàn)出獨(dú)特的pH依賴性熒光特性。與大多數(shù)在堿性條件下熒光更強(qiáng)的傳統(tǒng)染料不同，該染料在酸性環(huán)境中熒光信號會顯著增強(qiáng)。當(dāng)pH值從中性降至酸性范圍時，其熒光強(qiáng)度呈現(xiàn)急劇上升的趨勢

pH Red在細(xì)胞外僅表現(xiàn)出微弱熒光，這一特性使得實(shí)驗(yàn)過程中可能無需洗滌步驟，大大簡化了操作流程。pH Red染料為監(jiān)測內(nèi)體、溶酶體等酸性細(xì)胞區(qū)室提供了強(qiáng)有力的研究工具。雖然它在細(xì)胞外熒光較弱，但在吞噬體、溶酶體和內(nèi)體等酸性環(huán)境中熒光會顯著增強(qiáng)。這種特性使pH Red能夠特異性地檢測細(xì)胞內(nèi)的酸性區(qū)室，同時降低信號變異，顯著提高了成像和流式檢測的準(zhǔn)確性。此外，該染料還可與GFP、Fluo-8、鈣黃綠素或FITC標(biāo)記抗體等綠色熒光染料配合使用，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞多功能分析。

產(chǎn)品特性：

1)     分子量：698.94

2)     外觀：黑色固體

3)     溶解度：在DMSO中溶解

4)     Ex(nm)：576

5)     Em(nm)：579

pH熒光探針（紅600）的pH依賴性發(fā)射光譜

保存條件: 

-20℃避光保存，2年有效。

產(chǎn)品使用：（僅供參考）

1.      在制備pH Red熒光探針工作溶液之前，根據(jù)需要處理細(xì)胞。

2.      在DMSO中制備1至10 mM的pH Red熒光探針儲備溶液。通過將DMSO儲備溶液稀釋到含20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的緩沖液的Hanks溶液中，制備0.1至10 μM工作溶液。

3.      根據(jù)需要處理細(xì)胞。

4.      用pH Red熒光探針工作溶液孵育細(xì)胞，溫度為37 oC，時間為15分鐘至2小時。

5.      用HHBS緩沖液替換染料載入溶液。

6.      使用配有合適濾光片組的熒光儀器分析細(xì)胞。

7.      儲存液的保存：DMSO溶解后可分裝成單次用量，-80℃~-20℃保存，6個月內(nèi)穩(wěn)定。避免反復(fù)凍融。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

圖： 使用pH Red 600染色的活HeLa細(xì)胞圖像。將活HeLa細(xì)胞接種在96孔板中并培養(yǎng)過夜。去除培養(yǎng)基后，用Hanks平衡鹽溶液（HBSS）清洗細(xì)胞，然后以0.6 μM的pH Red 600在37°C染色30分鐘。染色后，再次用HBSS清洗細(xì)胞，并使用帶TRITC濾光片的熒光顯微鏡進(jìn)行成像。

注意事項(xiàng)：

1.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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