GAPDH的分子量為146 kDa,由4個(gè)30-40 kDa的亞基組成。該酶是糖酵解反應(yīng)中的一個(gè)關(guān)鍵酶,其主要功能是催化3-磷酸甘油醛氧化 (脫氫)和磷酸化,生成1,3-二磷酸甘油酸。由于GAPDH廣泛分布于各種組織中,幾乎在所有組織中都高水平表達(dá),且表達(dá)量相對(duì)恒定, 不受外部誘導(dǎo)物的影響,故被廣泛應(yīng)用于qPCR、WB等實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化內(nèi)參。Anti GAPDH Antibody-HRP是通過一定的工藝將辣根過氧化 物酶 (HRP) 偶聯(lián)至GAPDH抗體上,進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)時(shí)加入發(fā)光液A和B,一般是魯米諾和過氧化氫,在辣根過氧化物酶 (HRP) 的催化 作用下,魯米諾與過氧化氫反應(yīng)生成一種過氧化物,過氧化物不穩(wěn)定隨即分解,形成一種能發(fā)光的電子激發(fā)中間體,當(dāng)后者由激發(fā)態(tài)返回 至基態(tài),就會(huì)產(chǎn)生熒光,實(shí)現(xiàn)對(duì)GAPDH內(nèi)參蛋白的檢測(cè)。