<NW3214> 外泌體提取純化試劑盒（多合一）
<NW3214> 外泌體提取純化試劑盒（多合一）
貨號：NW3214-5T；
NW3214-20T
品牌：NoninBio
外泌體提取純化試劑盒（多合一）
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
NW3214-5T | 外泌體提取純化試劑盒（多合一） | 5T |
NW3214-20T | 外泌體提取純化試劑盒（多合一） | 20T |
【溫馨提示】：見我司整理的專注外泌體研究，外泌體提取專家，專注外泌體提取試劑盒產品專題。
產品簡介：
外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能，在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子；然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發的外泌體提取純化試劑盒，組分經過優化處理，適用于細胞培養上清液、血清血漿中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒，可用于電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。
保存條件:
室溫保存，2年有效。
產品組成：
名稱 | NW3214-5T | NW3214-20T |
Exosome Concentration Solution* | 30 mL | 120 mL |
Exosome Purification Filter* | 5 Tubes | 20 Tubes |
* Nuclease-free, Sterile
自備材料：
高速離心機，渦旋振蕩器，50 mL離心管，1.5 mL離心管，1×PBS緩沖液（無菌）。
產品使用：
一、 樣品預處理
1. 取樣：如果是凍存樣品，從冰箱取出后于25℃水浴中進行解凍，將完全融化后的樣品置于冰上，如果是新鮮樣品，收集樣品后置于冰上；
2. 樣品初始用量：單次提取時的樣品量建議細胞培養上清液不低于20 mL，血清/血漿不低于0.5 mL；
3. 離心去細胞碎片：將樣品轉移至離心管中，于4℃以 3,000 ×g（~6,200 rpm*/~5,200 rpm**）離心 10 min，去除樣品中的細胞碎片（注：若沉淀較多，可3,000 ×g，10 min離心多次至無明顯沉淀，每次取離心上清液）；
*為約7 cm有效離心半徑的小離心機換算（≤2 mL離心管），下同。
**為約10 cm有效離心半徑的大離心機換算（≥15 mL離心管），下同。
4. 離心去雜質碎片：將離心上清液轉移至新的離心管中，于4℃以10,000 ×g（~11,300 rpm*/~9,500 rpm**）離心10 min，去除樣品中的雜質碎片；
5. 上清液轉移：去除雜質碎片的上清液轉移到新離心管中。
二、 提取外泌體
1. 上清液預處理：在去除雜質的離心上清液中加入 Exosome Concentration Solution（ECS試劑），部分較為粘稠的樣品（血清、血漿等），需先加入預冷的1×PBS進行稀釋，然后再加入ECS試劑，具體的加入劑量如下（其他劑量請根據表中的用量等比例換算）：
樣品名稱 | 樣品劑量 | PBS劑量 | ECS劑量 |
細胞上清 | 20mL | — | 5mL |
血清/血漿 | 0.25 mL | 0.75 mL | 0.25 mL |
2. 溶液混合：加入 ECS 試劑后將離心管蓋緊，通過渦旋振蕩器混勻1 min，再放置于4℃靜置８h以上（注：增加靜置時間可提高外泌體得率，但不可超過24 h）；
3. 沉淀外泌體：取出裝有混合液的離心管于4℃以10,000 ×g（~11,300 rpm*/~9,500 rpm**）離心 60 min，棄上清，沉淀中富含外泌體顆粒（盡可能吸盡上清液）；
4. 再次離心：將含有沉淀的離心管再次于4℃以 10,000 ×g（~11,300 rpm*/~9,500 rpm**）離心 2 min，棄上清（注：盡可能吸盡上清液）；
5. 外泌體重懸：取合適量的1×PBS均勻吹打離心沉淀物，待其溶解后，將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管中（建議每20 mL細胞培養上清液或0.25 mL血清/血漿用 200 μL 左右1×PBS重懸）；
6. 收獲外泌體顆粒：將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm*）離心2 min，保留上清液，其中富含外泌體顆粒（注：若沉淀較多，可12,000×g，2 min離心多次至無明顯沉淀，每次取上清液）。
三、 純化外泌體
1. 純化外泌體：將收獲的外泌體顆粒粗品轉入 Exosome Purification Filter（EPF 柱）上室中，于 4℃以 3,000 ×g（~6,200 rpm*）離心10 min，離心后收集 EPF 柱管底的液體，此液體即為純化后的外泌體顆粒（注： EPF 柱不可重復使用）；
2. 外泌體的保存：純化后的外泌體以合適體積進行分裝凍存于-80℃低溫冰箱中，以備后續實驗使用。
注意事項：
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅用于生命科學研究，不得用于醫學診斷及其他用途！
相關產品：
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
120ml | ||
20T | ||
20T | ||
20T | ||
30T | ||
20T | ||
20T | ||
20T | ||
30T | ||
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5T | ||
20T | ||
20T | ||
20T | ||
20T |
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