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<NW3315> 外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版

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<NW3315> 外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版

外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版
貨號:NW3315-2T;
NW3315-20T
品牌:NoninBio
促銷: 400.00~3000.00
價格: 400.00~3000.00
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外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版

 

產品編號

產品名稱

包裝規格

NW3315-2T

外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版

2T

NW3315-20T

外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版

20T

【溫馨提示】:見我司整理的專注外泌體研究,外泌體提取專家,專注外泌體提取試劑盒產品專題。

產品簡介:

外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子,然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發的外泌體提取純化試劑盒,組分經過優化處理,適用于血清、血漿中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,可用于電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。

 

保存條件

Solution A存儲于-18℃以下,其他組分室溫保存,2年有效。

 

產品組成:

名稱

NW3315-2T

NW3315-20T

Solution A*-18℃保存)

2 mL

20 mL

Solution B*(常溫保存)

1 mL

6 mL

Exosome Purification Filter*

2 Tubes

20 Tubes

* Nuclease-free, Sterile

 

自備材料:

高速離心機,渦旋振蕩器,1.5 mL離心管,1×PBS緩沖液(無菌)。

 

產品使用:

一、 樣品預處理

1.      離心機在使用前先于4℃預冷10 min

2.      取樣:如果是凍存樣品,從冰箱取出后于25℃水浴中進行解凍,將完全融化后的樣品置于冰上,如果是新鮮樣品,收集樣品后置于冰上;

3.      將樣品按照500 μL每管進行分裝,不足部分用1×PBS 補足至500 μL

4.      離心去細胞碎片:將樣品轉移至1.5 mL離心管中,于 4℃3,000 ×g~6,200 rpm*)離心10 min,去除樣品中的細胞碎片(注:若沉淀較多,可3,000 ×g10 min離心多次至無明顯沉淀,每次取離心上清液);

*為約7 cm有效離心半徑的小離心機換算(≤2 mL離心管),下同。

5.      離心去雜質碎片:將離心上清液轉移至新的離心管中,于4℃12,000 ×g~12,400 rpm)離心10 min,去除樣品中的雜質碎片;

6.      上清液轉移:去除雜質碎片的上清液轉移到新離心管中。

 

二、 去除雜蛋白

1.      Solution A:在500 μL 血液樣品中加入400 μL預冷的 Solution A,立即將離心管蓋緊,通過渦旋振蕩器充分混勻30 s

2.      離心去蛋白:將混勻后的樣品于 4℃ 12,000 ×g ~12,400 rpm)離心20 min,去除樣品中的雜蛋白;

3.      上清液轉移:去除雜蛋白的離心上清液轉移至新的1.5 mL離心管中。

 

三、 提取外泌體

1.      Solution B:在去除雜蛋白的離心上清液中加入120 μL Solution B

2.      溶液混合:加入Solution B 試劑后將離心管蓋緊,通過渦旋振蕩器混勻1 min,再放置于4℃靜置30 min 以上(注:增加靜置時間可提高外泌體得率,但不可超過24 h);

3.      沉淀外泌體:取出裝有混合液的離心管于4℃12,000 ×g~12,400 rpm)離心15 min,棄上清,沉淀中富含外泌體顆粒(盡可能吸盡上清液);

4.      再次離心:將含有沉淀的離心管再次于 4℃ 12,000 ×g~12,400 rpm)離心2 min,棄上清(注:盡可能吸盡上清液);

5.      外泌體重懸:取合適量的1×PBS均勻吹打離心沉淀物,待其溶解后,將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管中(建議每500 μL血清血漿用200 μL左右1×PBS重懸);

6.      收獲外泌體顆粒:將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃ 12,000 ×g~12,400 rpm)離心2 min,保留上清液,其中富含外泌體顆粒(注:若沉淀較多,可12,000 ×g2 min離心多次至無明顯沉淀,每次取上清液)。

 

四、 純化外泌體

1.      純化外泌體:將收獲的外泌體顆粒粗品轉入 Exosome Purification FilterEPF 柱)上室中,于 4℃ 3,000 ×g~6,200 rpm)離心10 min,離心后收集EPF柱管底的液體,此液體即為純化后的外泌體顆粒(注:EPF 柱不可重復使用);

2.      外泌體的保存:純化后的外泌體以合適體積進行分裝凍存于-80℃低溫冰箱中,以備后續實驗使用。

 

注意事項:

1.      外泌體提取純化試劑盒(血清血漿)升級版適用于血清血漿,每1T可以提取20ml

2.      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

本產品僅用于生命科學研究,不得用于醫學診斷及其他用途!

 

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